Для синтеза гена по известной аминокислотной последовательности полипептида необходимо выполнить следующие шаги:
Написать кодонную последовательность, соответствующую заданной аминокислотной последовательности с учетом правил генетического кода. Для этого можно воспользоваться таблицей генетического кода.
Выбрать оптимальные кодоны для каждой аминокислоты, учитывая частоту использования кодонов в организме, в котором будет проводиться синтез (например, для людей это частоты кодонов в человеческом геноме).
Собрать оптимальную последовательность кодонов, обеспечивающую эффективное считывание и трансляцию в мРНК.
Синтезировать ген с полученной кодонной последовательностью, используя современные методы биологической синтеза ДНК, такие как ПЦР или химический синтез ДНК.
Вставить синтезированный ген в вектор, подходящий для экспрессии полипептида в живых клетках.
Трансформировать рекомбинантный вектор в хозяйские клетки и провести выражение гена с получением целевого полипептида.
Очистить и проанализировать полученный полипептид с целью проверки соответствия его аминокислотной последовательности заданной.
Таким образом, синтез гена по известной аминокислотной последовательности полипептида возможен путем перевода этой последовательности в кодонную последовательность, ее синтеза и экспрессии в клетках.
Для синтеза гена по известной аминокислотной последовательности полипептида необходимо выполнить следующие шаги:
Написать кодонную последовательность, соответствующую заданной аминокислотной последовательности с учетом правил генетического кода. Для этого можно воспользоваться таблицей генетического кода.
Выбрать оптимальные кодоны для каждой аминокислоты, учитывая частоту использования кодонов в организме, в котором будет проводиться синтез (например, для людей это частоты кодонов в человеческом геноме).
Собрать оптимальную последовательность кодонов, обеспечивающую эффективное считывание и трансляцию в мРНК.
Синтезировать ген с полученной кодонной последовательностью, используя современные методы биологической синтеза ДНК, такие как ПЦР или химический синтез ДНК.
Вставить синтезированный ген в вектор, подходящий для экспрессии полипептида в живых клетках.
Трансформировать рекомбинантный вектор в хозяйские клетки и провести выражение гена с получением целевого полипептида.
Очистить и проанализировать полученный полипептид с целью проверки соответствия его аминокислотной последовательности заданной.
Таким образом, синтез гена по известной аминокислотной последовательности полипептида возможен путем перевода этой последовательности в кодонную последовательность, ее синтеза и экспрессии в клетках.