При исследовании лактатдегидрогеназы в полиакриламидном геле используют фосфатный буфер с рН = 7,4. В каком соотношении нужно смешать раствор гидрофосфата натрия и дигидрофосфата калия с концентрацией 0,1 моль/л каждый, чтобы получить такой буферный раствор.
Для приготовления фосфатного буферного раствора с рН = 7,4 необходимо смешать гидрофосфат натрия (Na2HPO4) и дигидрофосфат калия (KH2PO4) в определенном соотношении.
Поскольку фосфатный буферный раствор содержит как гидрофосфат натрия, так и дигидрофосфат калия, то мы должны также учесть общее количество фосфата в итоговом растворе.
Коэффициенты пропорций можно выразить как х и у соответственно: Na2HPO4 + KH2PO4 = х + у = 0,1 моль/л фосфата
Учитывая рН = 7,4, получаем, что соотношение между Na2HPO4 и KH2PO4 будет выбираться так, чтобы обеспечить соответствующий буферный рН. Для этого пригодится применить уравнение Гендерсона-Хассельбальха.
На левой стороне имеем анион дигидрофосфата, на правой – ион водорода. Поэтому вновь буферный pH индекс будет зависеть от соотношения между этими соединениями.
Для приготовления фосфатного буферного раствора с рН = 7,4 необходимо смешать гидрофосфат натрия (Na2HPO4) и дигидрофосфат калия (KH2PO4) в определенном соотношении.
Поскольку фосфатный буферный раствор содержит как гидрофосфат натрия, так и дигидрофосфат калия, то мы должны также учесть общее количество фосфата в итоговом растворе.
Молярные массы соединений:
Na2HPO4 = 141,96 г/моль
KH2PO4 = 136,09 г/моль
Для получения концентрации 0,1 моль/литр необходимо учитывать общее содержание фосфата в растворе:
0,1 моль/литр Na2HPO4 = 0,1 моль/л фосфата0,1 моль/литр KH2PO4 = 0,1 моль/л фосфатаКоэффициенты пропорций можно выразить как х и у соответственно:
Na2HPO4 + KH2PO4 = х + у = 0,1 моль/л фосфата
Учитывая рН = 7,4, получаем, что соотношение между Na2HPO4 и KH2PO4 будет выбираться так, чтобы обеспечить соответствующий буферный рН. Для этого пригодится применить уравнение Гендерсона-Хассельбальха.
Работая с химическим уравнением:
Na2HPO4 + H2O ↔ NaOH + H2PO4-
На левой стороне имеем анион дигидрофосфата, на правой – ион водорода. Поэтому вновь буферный pH индекс будет зависеть от соотношения между этими соединениями.